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      蛋白印跡膜再生液實(shí)際操作技巧和注意事項(xiàng)
      點(diǎn)擊次數(shù):7779 更新時(shí)間:2021-03-17

      蛋白印跡膜再生液說明書

      Stripping Buffer

      目錄號(hào):K0056

      保存條件:室溫(15-25℃)保存。

       規(guī)格說明

       Cat. No.  K0056      K0056A

      Volume     100 ml      500 ml   

       產(chǎn)品簡介

        本產(chǎn)品采用溫和洗滌配方,可在不影響目的蛋白的情況下,去除結(jié)合在印跡膜上

      的一抗和二抗,使同一張膜可進(jìn)行多次抗體檢測(cè),無需反復(fù)電泳和轉(zhuǎn)膜,節(jié)省樣品和

      時(shí)間,適用于使用NCPVDF膜進(jìn)行Western Blot檢測(cè)時(shí)條件的優(yōu)化或同一樣品不同蛋

      白的檢測(cè)。

       本產(chǎn)品僅供科研使用,請(qǐng)勿用于臨床診斷及其他用途    

       注意事項(xiàng)

       1.建議先檢測(cè)表達(dá)量較低的目的蛋白,用再生液處理后檢測(cè)表達(dá)量高的蛋白,如內(nèi)參蛋白等。

      2.請(qǐng)佩戴手套操作。

       操作步驟

       1.將曝光后的膜取出,加入適量的再生液(再生液充分覆蓋膜表面,8.5 cm×5.5 cm膜加入15  ml左右再生液),室溫振搖孵育15分鐘左右(孵育時(shí)間應(yīng)根據(jù)不同的目的蛋白來調(diào)整:比如內(nèi)參抗體等表達(dá)量較高的蛋白,使用再生液時(shí)可以延長孵育時(shí)間至1小時(shí)或者在37℃孵育30分鐘)。

      2.棄去再生液,用15 ml緩沖液(PBSTTBST)洗膜3次,每次5 分鐘,室溫振搖。

      3.為了檢測(cè)酶標(biāo)二抗洗脫是否*,此時(shí)可以用顯色方法來確定二抗是否洗脫掉。

      4.待檢測(cè)完畢,確認(rèn)膜上無殘留的酶活性,再生后的膜通過加入15 ml的封閉液進(jìn)行封閉,室溫30分鐘或者4℃封閉過夜。

      5.重新加入待測(cè)一抗,進(jìn)行下一輪的WB實(shí)驗(yàn)。

       

      實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

       

      WB代做

      HE染色

      免疫熒光染色

      蛋白相互作用分析

      ELISA免費(fèi)代檢測(cè)

      免疫組化

      熒光定量PCR

      番紅O固綠染色

      流式細(xì)胞檢測(cè)

      激光共聚焦

      透射電鏡服務(wù)

      DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

      免疫共沉淀(Co-IP

      DNA甲基化

      掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

      microRNA 測(cè)序

      半定量RT-PCR

      分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

      原位雜交(FIsh

      石蠟/冰凍切片

      RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP

      CCK8檢測(cè)

      蛋白雙向(2-D)電泳

      蛋白雙向2D-WB

      ATP/ADP檢測(cè)

      Taqman探針

      細(xì)胞劃痕

      基因組DNA提取

       

      滬公網(wǎng)安備 31011802001678號(hào)

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