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      人胸苷酸合成酶(TS)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
      點(diǎn)擊次數(shù):1361 更新時(shí)間:2011-11-01

      胸苷酸合成酶(TSELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

       

      本試劑僅供研究使用       目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中胸苷酸合成酶(TS活性。

      實(shí)驗(yàn)原理:

        本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人胸苷酸合成酶(TS水平。用純化的人胸苷酸合成酶(TS抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胸苷酸合成酶(TS),再與HRP標(biāo)記的胸苷酸合成酶(TS抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胸苷酸合成酶(TS呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人胸苷酸合成酶(TS濃度。

      試劑盒組成

      試劑盒組成

      48孔配置

      96孔配置

      保存

      說(shuō)明書

      1

      1

       

      封板膜

      2片(48

      2片(96

       

      密封袋

      1個(gè)

      1個(gè)

       

      酶標(biāo)包被板

      1×48

      1×96

      2-8℃保存

      標(biāo)準(zhǔn)品:72U/L

      0.5ml×1

      0.5ml×1

      2-8℃保存

      標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      1.5ml×1

      1.5ml×1

      2-8℃保存

      酶標(biāo)試劑

      3 ml×1

      6 ml×1

      2-8℃保存

      樣品稀釋液

      3 ml×1

      6 ml×1

      2-8℃保存

      顯色劑A

      3 ml×1

      6 ml×1

      2-8℃保存

      顯色劑B

      3 ml×1

      6 ml×1

      2-8℃保存

      終止液

      3ml×1

      6ml×1

      2-8℃保存

      濃縮洗滌液

      20ml×20倍)×1

      20ml×30倍)×1

      2-8℃保存

       

      樣本處理及要求

      1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

      2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

      3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

      4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBSPH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

      5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

      6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

      7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

      試劑盒性能:

      1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。

      2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%15%

      保存條件及有效期:

      1.試劑盒保存:2-8

      2.有效期:6個(gè)月

       

      滬公網(wǎng)安備 31011802001678號(hào)

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