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      B95-8絨猴EBV轉化的白細胞
      點擊次數:1247 更新時間:2015-03-24

      細胞名稱          B95-8絨猴EBV轉化的白細胞 

      種屬            絨猴 

      組織來源          外周血 

      生長狀態          懸浮細胞 

      培養條件          培養基類型:RPMI1640培養基 

                    FBS:10% 

                    抗生素:雙抗 

                    培養條件:37℃,CO2:5% 


      傳代方法          收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態: 

                        如果沒長滿,將培養瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮 

                    培養液,繼續培養。 

                        如果細胞已經長滿(約80%-90%)則傳代后繼續培養。 

                    貼壁細胞傳代方法: 

                    1棄去培養基,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。 

                    2加1ml0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細胞接觸 

                    后放入37℃培養箱內,隨時觀察細胞狀態變化,待細胞大部分變 

                    圓后加*培養基終止消化。 

                    懸浮細胞傳代方法:可以直接傳代也可以離心法傳代。 

                    1直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3, 

                    吹打細胞形成細胞懸液后,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續 

                    培養。 

                    2離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心管內,1000rpm, 

                    5分鐘,去除上清,加新的培養液到離心管內,吹打細胞形成細胞 

                    懸液后,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。 

                     一般沒有特殊說明,細胞一般是一傳二。 

      凍存方法          70%*培養基,20%FBS,10%DMSO,現用現配。 

                    儲存:液氮中長期保存。 

      注             1觀察細胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計細胞密度。 

                    2在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發生部分脫落,可 

                    離心吹打后重新種入瓶中培養。 

                    3收到細胞后若發現培養瓶破損、細胞污染等,請在一周內與我們 

                    。

      滬公網安備 31011802001678號

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