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      人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒實驗原理
      點擊次數:1842 更新時間:2010-09-16

      人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒實驗原理

       

       

       

      1 采用雙抗體夾心法測定標本中人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISAKit水平。

      2. 首先用純化的人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISAKit抗體包被微孔板,制成固相抗體。

      3. 然后往包被單抗的微孔中依次加入穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISAKit再與HRP標記的穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISAKitt抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成    藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。

      4. 顏色的深淺和樣品中的穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISAKit呈正相關。

      5.  zui后用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算出樣品中穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISAKit濃度

      目的:測定人的血清,血漿及相關液體樣本中穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISAKit的含量。

       

      5. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。

      6. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000/分)去除顆粒。仔細收集上清,如有沉淀,再次離心。

      安全性:
      1
       避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
      2
       實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
      3
       不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。

      4   Elisa試劑盒請遠離兒童

      自備物品:

      1 37 ℃ 恒溫箱

      2 、 標準規格酶標儀

      3 、 精密移液器及一次性吸頭

      4 、 蒸餾水

      5 、 一次性試管

      6 、 吸水紙

       

      保存條件及有效期:

      1.試劑盒保存:;2-8℃。

      2.有效期:6個月

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